紫外及可見光分光光度計的可測波長范圍為200一1000 nm，也有波長范圍為200- 400 nm的紫外分光光度計，但前者較為普遍。紫外及可見光分光光度計的構(gòu)造原理與可見光分光光度計(如721型分光光度計)相似。由于玻璃吸收紫外光，因此單色器要用石英棱鏡或光柵。

(一)光(light source)

有鎢絲燈及氫燈(或氛燈)兩種?？梢姽鈪^(qū)(360一1000 nm)使用鎢絲燈;紫外光區(qū) (200一360 nm)則用氫燈或氛燈。

(二)吸收池(absorption cell)

由于玻璃吸收紫外光.吸收池要用石英材質(zhì)。

(三)檢瀏器(detector)

檢側(cè)器使用兩只光電管，一為氧化艷光電管，用于625一1000 nm波長范圍;另一只是銻艷光電管，用于200一625 nm波長范圍。光電倍增管亦為常用的檢測器，其靈敏度比一般的光電管高2個數(shù)量級。

圖1是紫外及可見光分光光度計原理圖。

紫外及可見光分光光度計分單光束和雙光束型。單光束型儀器使用前一般需要預(yù)熱以使儀器穩(wěn)定，缺點是難以消除與補償由于光源與電子測量系統(tǒng)不穩(wěn)定等所引致的誤差。雙光束型儀器能夠消除與補償由于光源、電子測量系統(tǒng)不穩(wěn)定等所引致的誤差，所以其測盤的*度*提高了。雙光束型儀器的工作原理如圖2所示。

其工作原理可描述為:由光源(鎢絲燈氘燈，根據(jù)波長而變換使用)發(fā)出的光經(jīng)人口狹縫及反射鏡反射至石英棱鏡或光柵，色散后經(jīng)過出口狹縫而得到所需波長的單色光束。然后由反射鏡反射至由馬達轉(zhuǎn)動的調(diào)制板及扇形鏡上。當(dāng)調(diào)制板以一定轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)時，時而使光束通過，時而擋住光束，因而調(diào)制成一定頻率的交變光束。之后扇形鏡在旋轉(zhuǎn)時，將此交變光束交替地投射到參比溶液(空白溶液)及試樣溶液上，后面的光電倍增管接受通過參比溶液及為試樣溶液所減弱的交變光通量，并使之轉(zhuǎn)變?yōu)闇y量信號。此信號經(jīng)放大并用解調(diào)器分離及整流，然后以電位器自動平衡此兩直流信號的比率，并依照記錄器記錄得到吸收曲線。